ICS07.100.30 B 20 DB22 备案号：41839-2014 吉 林省地方标准 DB 22/T 2051—2014 饲料中肉毒梭菌测定PCR方法 Determination of Clostridium botulinum in feedstuffs PCR method 2014-02-28发布 2014-04-30实施 吉林省质量技术监督局 发布   DB22/T 2051—2014 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。 本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。 本标准主要起草单位：吉林省产品质量监督检验院、国家农业深加工产品质量监督检验中心、中华 人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国顺德出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：史艳宇、刘金华、邵秋荣、刘斌、周亮、刘晓晖、王潇、任明月。 I   DB22/T 2051—2014 饲料中肉毒梭菌测定 PCR方法 1 范围 本标准规定了饲料中肉毒梭菌的PCR检验方法。 本标准适用于饲料中A、B、E、F型肉毒梭菌的快速筛选检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 27403 实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 肉毒梭菌 clostridium botulinum 肉毒梭菌为梭菌科梭菌属革兰氏阳性芽孢杆菌，厌氧，在适宜的培养基及特定的环境条件下产生一 类具有很强毒性的神经麻痹毒素，即肉毒毒素。 4 原理 样品增菌后，培养物经DNA提取制备PCR模板，进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物是否 有特征条带，从而对饲料中是否污染肉毒梭菌进行快速检验。 5 试剂 除特别说明以外，所有试剂均为分析纯，水为按照GB/T 6682规定的一级水。所有试剂均用无DNA 酶污染的容器分装。 5.1 引物：见表1。 1