中华人民共和国国家标准GB5009.96—2016食品安全国家标准食品中赭曲霉毒素A的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.96—2016前言本标准代替 /—《食品中赭曲霉毒素 A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱GBT25220—2010《粮油检验粮食中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法和荧光光度法》GBT23502 2009法》 //—《谷物和大豆中赭曲霉毒素 A的测定》SN/T1746—2006《进出口大豆油菜籽和GBT5009.96 2003食用植物油中赭曲霉毒素 A的检验方法》SN/T1940—2007《进出口食品中赭曲霉毒素A 的测定方法》和SN0211—1993《出口粮谷中棕曲霉毒素 A的检验方法》GBT23502—2009相比,主要变化如下 :本标准与 /———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素 A的测定”;———增加了第三法免疫亲和层析净化液相色谱 -串联质谱法和第四法酶联免疫吸附测定法;———增加了适用范围并优化了提取方法;———删除了免疫亲和柱层析净化荧光光度法ⅠGB5009.96—2016食品安全国家标准食品中赭曲霉毒素 A的测定范围1本标准规定了食品中赭曲霉毒素A的测定方法本标准第一法适用于谷物 油料及其制品 酒类酱油醋酱及酱制品葡萄干胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A的测定,第二法适用于玉米稻谷(糙米)小麦小麦粉大豆咖啡葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定,第三法适用于玉米 小麦等粮食产品 辣椒及其制品等 啤酒等酒类酱油等产品生咖啡 熟咖啡中赭曲霉毒素 A的测定,第四法适用于玉米小麦大麦大米大豆及其制品中赭曲霉毒素A的测定,第五法适用于小麦 玉米大豆中赭曲霉毒素 A的测定第一法免疫亲和层析净化液相色谱法原理2用提取液提取试样中的赭曲霉毒素A,经免疫亲和柱净化后 ,采用高效液相色谱结合荧光检测器测定赭曲霉毒素 A的含量,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1甲醇():色谱纯CHOH33.1.13.1.23.1.33.1.4乙腈( ):色谱纯CHCN3冰乙酸():色谱纯CHO2 42氯化钠(NaCl)3.1.5聚乙二醇[HOCH2CHO CH CHOH(· )]22n2吐温(3.1.6 20CHO58 11426)3.1.7碳酸氢钠(NaHCO3)磷酸二氢钾()KHPO243.1.83.1.9浓盐酸(HCl)3.1.10氮气(N2):纯度≥99.9%试剂配制3.2提取液Ⅰ:甲醇-水(80+20)3.2.11GB5009.96—20163.2.2提取液Ⅱ:称取150.0g氯化钠20.0g碳酸氢钠溶于约 950mL水中,加水定容至1L提取液Ⅲ:乙腈-水(60+40)3.2.33.2.4冲洗液:称取25.0g氯化钠5.0g碳酸氢钠溶于约 950mL水中,加水定容至1L3.2.5真菌毒素清洗缓冲液:称取25.0g氯化钠5.0g碳酸氢钠溶于水中 ,加入0.1mL吐温20,用水稀释至1L3.2.6磷酸盐缓冲液:称取8.0g氯化钠1.2g磷酸氢钠0.2g磷酸二氢钾0.2g氯化钾溶解于约至,用水稀释至1L990mL水中,用浓盐酸调节 pH 7.03.2.7碳酸氢钠溶液(10gL/):称取1.0g碳酸氢钠,用水溶解并稀释到 100mL3.2.8淋洗缓冲液:在1000mL磷酸盐缓冲液中加入 1.0mL吐温20标准品3.3AC20H18ClNO6,CAS号:303-47-9),纯度≥99%或经国家认证并授予标准物质证赭曲霉毒素 (书的标准物质 标准溶液配制3.43.4.1赭曲霉毒素A标准储备液:准确称取一定量的赭曲霉毒素A标准品,用甲醇-乙腈(50+50)溶解,配成/ 的标准储备液 ,在-20℃保存,可使用3个月0.1mgmL3.4.2赭曲霉毒素A标准工作液:根据使用需要,准确移取一定量的赭曲霉毒素 A标准储备液(3.4.1),用流动相稀释,分别配成相当于 1ngmL5ngmL10ngmL20ngmL5