中华人民共和国国家标准GB5009.24—2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M族的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.24—2016前言本标准代替GB5413.37—2010《食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定》GB5009.24—2010《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定》 /GBT23212 2008—《牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 的测定B B G G M M2高效液相色谱法-荧光检测法》和SN/T1664—121212005《牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 2M B B G G含量的测定》1121本标准与 GB5413.37—2010相比,主要变化如下 :———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素 M族的测定”;———增加了方法适用范围 ;———增加了对黄曲霉毒素 M2的检测;———修改了酶联免疫法 ,并修改第三法名称为酶联免疫吸附筛查法;———修改了液相色谱-质谱联用法;———修改了液相色谱法的前处理方法 ;———删除了免疫层析净化荧光分光度法ⅠGB5009.24—2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M族的测定范围1本标准规定了食品中黄曲霉毒素M1和黄曲霉毒素M2(以下简称AFTM1和AFTM2) 的测定方法第一法为同位素稀释液相色谱 串联质谱法,适用于乳乳制品和含乳特殊膳食用食品中AFTM1和AFTM2的测定-第二法为高效液相色谱法 ,适用范围同第一法 第三法为酶联免疫吸附筛查法 ,适用于乳乳制品和含乳特殊膳食用食品中AFTM1的筛查测定第一法同位素稀释液相色谱-串联质谱法原理2试样中的黄曲霉毒素 M1和黄曲霉毒素M2用甲醇水溶液提取,上清液用水或磷酸盐缓冲液稀释-后,经免疫亲和柱净化和富集 ,净化液浓缩定容和过滤后经液相色谱分离,串联质谱检测,同位素内标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1乙腈( ):色谱纯3.1.13.1.23.1.33.1.43.1.53.1.63.1.73.1.83.1.9CHCN3甲醇():色谱纯CHOH3乙酸铵()CHCOONH34氯化钠(NaCl)磷酸氢二钠()NaHPO24磷酸二氢钾()4KHPO2氯化钾(KCl)盐酸(HCl)石油醚(n 2n+2):沸程为30℃~60℃CH试剂配制3.23.2.1乙酸铵溶液(5mmolL/):称取0.39g乙酸铵,溶于1000mL水中,混匀3.2.2乙腈-水溶液(25+75):量取250mL乙腈加入750mL水中,混匀3.2.3乙腈-甲醇溶液(50+50):量取500mL乙腈加入500mL甲醇中,混匀1GB5009.24—20163.2.4磷酸盐缓冲溶液(以下简称PBS):称取8.00g氯化钠1.20g磷酸氢二钠(或2.92g十二水磷酸氢二钠)0.20g磷酸二氢钾0.20g氯化钾,用900mL水溶解后,用盐酸调节pH至7.4, 再加水至1000mL标准品3.33.3.1 AFTM1标准品(CH O CAS6795-23-9):纯度≥98%,或经国家认证并授予标准物质证书,:17 127的标准物质3.3.2 AFTM2标准品(CH O CAS6885-57-0):纯度≥98%,或经国家认证并授予标准物质证书,:17 147的标准物质3.3.313C-AFTMCHO 0.5gmL同位素溶液():/μ17 117 147标准溶液配制3.4标准储备溶液(/):分别称取AFTM1和AFTM21mg(精确至0.01mg),分别用乙腈10gmLμ3.4.1溶解并定容至 100mL将溶液转移至棕色试剂瓶中,在-20℃下避光密封保存临用前进行浓度校准(校准方法参见附录 A)混合标准储备溶液( / ):分别准确吸取 /10gmLAFTM和AFTM2标准储备液 1.00mLμ13.4.21.0gmLμ于同一10mL容量瓶中,加乙腈稀释至刻度,得到 /的混合标准液