ICS65.020.20DB13B 05河北省地方标准DB13/T 2404—2016猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法2016-09-30发布2016-12-01实施河北省质量技术监督局发布 DB13/T 2404—2016前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由河北省畜牧局提出。本标准起草单位：河北农业大学。本标准主要起草人：袁万哲、孙继国、宋勤叶、马增军、金东航、李丽敏、张磊、李睿文。I DB13/T 2404—2016猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法12范围本标准规定了猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法的技术要求。本标准适用于检测猪粪便、腹泻猪胃肠及其内容物和这些采集样品培养物中的猪流行性腹泻病毒。缩略语下列缩略语适用于本文件。DEPC：焦碳酸二乙酯（diethypyrocarbonate）；dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxy-ribonucleoside triphosphate）；EB：溴化乙锭（ethidium bromide）；PCR：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）；RNA：核糖核酸（ribonucleic acid）；RT-PCR：反转录-聚合酶链式反应（reverse-transcription polymerase chain reaction）；Vero细胞：非洲绿猴肾细胞；cDNA：互补脱氧核糖核酸。3主要仪器3.1PCR仪。3.23.33.43.53.63.73.8凝胶成像系统。台式低温高速离心机。电泳仪。电泳槽。冰箱。微量移液器。水浴锅。4主要试剂4.1LS TRIzol RNA提取试剂或其他商品化的RNA提取试剂。4.2氯仿。4.31.0%琼脂糖凝胶：见附录A中A.1。4.450×TAE缓冲液：见附录A中A.2。1