附件2
保健食品中罗格列酮和格列苯脲的快速检测
胶体金免疫层析法
（KJ201902）
范围
本方法规定了保健食品中罗格列酮和格列苯脲的胶体金免疫层析快速筛查方法。
本方法适用于声称具有辅助降血糖功能的保健食品中罗格列酮和格列苯脲成分的快速筛查。
原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的罗格列酮和格列苯脲等物质经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中罗格列酮和格列苯脲成分进行定性判定。
试剂与材料
试剂
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
甲醇：色谱纯。
三羟甲基氨基甲烷，Tris碱。
浓盐酸。
吐温-20。
盐酸溶液：量取浓盐酸（3.1.3）16.7 mL，用水溶解并稀释至100 mL。
缓冲液：称取12.1 g Tris碱（3.1.2），加适量水溶解，混匀，用盐酸溶液（3.1.5）调节pH至8.0，加入5.0 g吐温-20（3.1.4）搅拌均匀，定容至1000 mL。
参考物质
参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度均≥99%。
表1 参考物质信息表
序号
中文名称
英文名称
CAS登录号
分子式
相对分子量
1
马来酸罗格列酮
Rosiglitazone maleate
155141-29-0
C18H17N3O3S
355.41
2
格列苯脲
Glyburide
10238-21-8
C23H28ClN3O5S
494.00
注：或等同可溯源物质。
标准溶液配制
罗格列酮标准储备液（1.0 mg/mL）：精密称取适量罗格列酮参考物质（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0?mg/mL的标准储备液。-20℃避光保存，有效期1年。
罗格列酮标准工作液（10?μg/mL）：精密移取适量罗格列酮标准储备液（1.0mg/mL）（3.3.1）分别置于10?mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为10?μg/mL的标准工作液。-20℃避光保存，有效期3个月。
格列苯脲标准储备液（1.0 mg/mL）：精密称取适量格列苯脲参考物质（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0?mg/mL的标准储备液。-20℃避光保存，有效期1年。
格列苯脲标准工作液（10?μg/mL）：精密移取适量格列苯脲标准储备液（3.3.3）分别置于10?mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为10?μg/mL的标准工作液。-20℃避光保存，有效期3个月。
材料
罗格列酮胶体金免疫层析试剂盒及配套的试剂（可选），适用基质为保健食品。
格列苯脲胶体金免疫层析试剂盒及配套