CNAS - G L 043 兽医检测实验室 ELISA 试验测量 说明: CNAS LOGO（新） 不确定度评估指南 Guide to the Evaluation of Uncertainty in ELISA Test Measurement in Veterinary Laboratory 中国合格评定国家认可委员会 兽医检测实验室 ELISA 试验测量不确定度评估指南 1 、适用范围 本指南规定了兽医检测实验室对 ELISA 试验进行测量不确定度评估的“从上到 下法”和“从下到上法”。 本指南适用于兽医检测实验室对 ELISA 进行测量不确定度的评估。 2 、引用文件 下列文件中的条款通过引用而成为本文件的条款。以下引用的文件，注明日期的， 仅引用的版本适用；未注明日期的，引用文件的最新版本（包括任何修订）适用。 3.1 CNAS— CL01《检测和校准实验室能力认可准则》 3.2 CNAS-CL01-G003:2019《测量不确定度的要求》 3.3 OIE《Manual of Diagnostic Tests and Vaccine for Terrestrial Animals 》 (2019)：Chapter1.1.5 “Quality management in veterinary testing laboratories”、 Chapter .2.2.4 “Measurement uncertainty” 3 、术语 和定义 测量不确定度： 与测量结果相关联的参数，表征合理地赋予被测量值的分散性。 标准不确定度： 以标准偏差表示的测量不确定度称为标准不确定度，以 u 表示。 扩展不确定度： 确定测量结果区间的量，合理赋予被测量之值分布的大部分可望 含于此区间。 不确定度的 A 类评定： 对在规定测量条件下测得的量值用统计分析的方法进行的 测量不确定度分量的评定。 不确定度的 B 类评定： 用不同于测量不确定度 A 类评定的方法对测量不确定度分 量进行的评定。 合成标准不确定度： 当测量结果是由若干个其他量的值求得时，按其他各量的方 差（和）协方差算得的标准不确定度。 自由度： 在方差计算中，和的项数减去对和的限制数 , 符号为 。 . 置信概率： 与置信区间或统计包含区间有关的概率值（ 1 - ）， 为显著性水平。 当测量值服从某分布时，落在某区间的概率 P 即为置信概率。置信概率是介于（ 0 ， 1 ） 之 间的数，常用百分数表示。在不确定度评定中置信概率又称置信水准或置信水平。 . 包含因子： 为 获得扩展不确定度，而对合成标准不确定度所乘的数字因子。包含 因子一般以 K 表示。置信概率为 P 时的包含因子用 K P 表示。 4 、“从下到上法” / “影响因素分析法”评估 ELISA 测量不确定度的步骤 4.1确定ELISA试验检测结果不确定度来源 4.1.1 A 类 不确定度因素 A 类不确定度影响因素包括（但可能不限于）对被稀释后的被检血清或抗原的每 个浓度进行的多个平行进检测引起的不确定度、不同人员之间不同检测同一样品引起 的测量不确定度、标准样品引起的不确定度、不同品牌试剂用于同一血清进行引起的 不确定度、被检样品 / 试剂盒存放条件引起的不确定度、采样是否正确及样品是否被 污染引起的不确定度、样品运输和储存条件引起的不确定度、处理样品引起的不确定 度、环境条件引起的不确定度、设备因素引起的不确定度、未知的随机因素引起的不 确定度。 4.1.2 B 类不确定度影响因素 B 类不确定度因素因素包括（ 但可能不限于） 酶标仪的分辨力、孵育所用的恒 温箱温度、加样器、天平、未知随机因素（如设备供电是否稳定、环境温度是否变化 很大、试剂反复冷藏、人员身体状况等等）。 4.2 影响 ELISA 试验检测结果各因素不确定度的评估 4.2.