ICS11.100C50中华人民共和国卫生欧亿·体育（中国）有限公司标准/WST461—2015糖化血红蛋白检测MeasurementofHemoglobinA1c2015-06-23发布2015-12-31实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布 /WST461—2015前言本标准按照 GBT1.1/—2009给出的规则起草 。本标准起草单位 :北京医院、北京市医疗器械检验所 、北京大学人民医院 。本标准主要起草人 :王冬环、陈文祥、张传宝、马嵘、孙京昇、续勇、贺学英、毕春雷、纪立农。Ⅰ /WST461—2015糖化血红蛋白检测范围1本标准规定了糖化血红蛋白的检测和质量保证。本标准适用于临床实验室及从事流行病学研究的实验室开展糖 化血红蛋白的检测,试剂或仪器生产厂商可参照使用 。术语和定义2下列术语和定义适用于本文件 。2.1分析系统analyticalsystem适合对某检验项目在规定浓度范围内给出分析结果的一组按规 定条件使用的仪器和装置, 包括试剂和物品。注:对于临床检验 ,分析系统主要由按规定条件使用的仪器、试剂和校准物组成 。2.2验证verification为给定项目满足规定要求提供客观证据。注:本文件中的验证主要是指分析系统的验证,即某分析系统在本实验室的性能是否与规定性能指标或厂商提供的性能指标一致 。2.3糖化血红蛋白HemoglobinA;HbA1c 1c人体血液中葡萄糖与血红蛋白 β链N末端缬氨酸残基以共价键结合的稳定的化合物,全称为:血红蛋白β链(血液)-N-1-(脱氧果糖-1-基)血红蛋白β链。注:为避免混淆 ,国际专家组织建议 ,糖化血红蛋白的术语应为 HbA1c,在指南或教育欧亿·体育（中国）有限公司中可以使用缩写A1C述糖化血红蛋白 。描分析方法概述3HbA1c是糖化血红蛋白的主要组成成分 ,占总糖化血红蛋白 (glycatedHemoglobinGHb,)的60%,目前临床定量测定及应用的是 HbA1c结果。HbA1c由葡萄糖的游离醛基与HbA的β链N末端缬氨酸的氨基经非酶促结合反应 ,先形成不稳定的 Schiff碱(醛亚胺),然后经过Amadori(葡糖胺)重排,最后形成稳定的酮胺化合物 ,其含量主要取决于血糖浓度及血糖与血红蛋白的接触时间,可以反映测定前120d的平均血糖水平 ,糖化血红蛋白的个体内生物学变异小于 2%。目前临床实验室普遍采用的糖化血红蛋白测定方法有多种,按原理可分为两大类 :一类是基于糖化与非糖化血红蛋白所带电荷不同 ,如离子交换层析法 、电泳法;另一类是基于糖化与非糖化血红蛋白的结构不同,如免疫法、亲和层析法及酶法等。不同方法采用的原理不同,所测组分不同,如:离子交换色谱法测定 HbA1c,亲和层析法测定总糖化血红蛋白等,但由于国际临床化学与医学实验室联盟(IFCC)及美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)的标准化工作 ,糖化血红蛋白的测定方法均应以 “HbA1c”或相当于“HbA1c”报告结果。1 /WST461—2015干扰因素4概述4.1糖化血红蛋白是红细胞中血红蛋白与葡萄糖的结合产物,因此,任何引起血红蛋白数量与质量变化的因素都会干扰 HbA1c测定,对结果产生影响 。干扰因素包括 :血红蛋白病、衍生血红蛋白 、红细胞生存周期的异常及药物等 。有些干扰因素及干扰程度取决于所采用的测定方法(方法学特异),而有些干扰无论采用何种方法都无法克服 (非方法学特异)。实验室应知晓 HbA1c测定存在的干扰因素 ,某些患者人群可能需要用某种特异 的HbA1c 测定方法或不适宜采用 HbA1c来反映体内平均血糖水平 。非方法学特异的干扰因素红细胞生存周期的异常4.24.2.1任何可能缩短红细胞寿命的因素如 :溶血性贫血、大量失血、脾肿大、风湿性关节炎、 慢性肝脏4.2.1.1疾病等均可使 HbA1c的测定结果假性降低 。任何可以引起红细胞平均寿命增加的因素如:脾切除、再生障碍性贫血、缺乏维生素B12、肾损4.2.1.2伤等均可使 HbA1c的测定结果假性升高 。血红蛋白病4.2.2目前许多测定方法可以在一定程度上克服大部分常见的变异血 红蛋白的干扰,但仍有特殊的变异血红蛋白干扰测定结果 。药物4.2.3维生素C和维生素E可以抑制血红蛋白的糖基化,长期大剂量服用可以使HbA1c测定结果假4.2.3.1性降低。4.2.3.24.2.3.3长期大剂量服用乙酰水杨酸盐 、嗜酒会导致血红蛋白乙酰化 ,使HbA1c测定结果假性升高。长期使用慢性麻醉剂 、羟基脲,可以使HbA1c测定结果假性升高 。妊娠4.2.4妊娠时血容量增加 ,使HbA1c测定结果假性降低 。进展迅速的1型糖尿病4.2.5HbA1c不能真实反映急性血糖变化情况 ,测定结果假性降低 。黄疸、高脂血症4.2.6严重的黄疸、高脂血症可能干扰测定结果,使测定结果假性升高 。方法学特异的干扰因素4.3总述4.3.1通常情况下,变异血红蛋白及衍生血红蛋白主要干扰基于糖化与 非糖化血红蛋白所带电荷不同的2 /WST461—2015离子交换色谱法 ,包括离子交换高效液相色谱法 (HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)。某些测定方法在参考区间内不受变异血红蛋白及衍生血红蛋白 的干扰,但随着糖化血红蛋白值的增高,干扰也会增加 ,需仔细观察测定结果图谱 。血红蛋白病4.3.2变异血红蛋白 HbSHbC、、HbD和HbE等可使测定结果假性降低或升高,主要取决于变异血红蛋白的种类和所采用的测定方法 。衍生血红蛋白4.3.3肾病患者可使血红蛋白甲酰化 ,使测定结果假性升高 。醛亚胺(Schiff碱)的干扰4.3.4Schiff碱是HbA1c形成过程的中间体 ,也称“HbA1c前体”或“不稳定的 HbA1c”,主要干扰基于糖化与非糖化血红蛋白所带电荷不同原 理的离子交换色谱法,可参照厂家操作说明自动或手工去除Schiff碱的干扰。目前许多全自动的测定方法已经在很大程度上消 除了Schiff碱的干扰,但个别样品的干扰依然存在,会使测定结果假性升高 ,离子交换 HPLC法亦包括在内 ,因此,应仔细观察测定结果图谱 。样品采集、处理和储存5样品采集5