MV_RR_CNJ_0052圆二色谱仪检定规程1.圆二色谱仪检定规程的说明编号名称JJG(教委)026-1996(中文)圆二色谱仪检定规程(英文) Verification regulation for circular dichroism spectrometer国家教育委员会归口单位起草单位主要起草人批准日期实施日期替代规程号适用范围国家教育委员会高松1997年1月22日1997年4月1日无本规程适用于新安装、使用中和修理后的，波长范围为180nm～700nm(或以此为主要谱区)的圆二色谱仪(以下简称仪器)的检定。主要技术要求1.外观要求2.安装条件3.检定环境4.检定设备(检定用标准物质)5.检定项目和检定方法无24科学技术文献出版社是否分级检定周期(年)附录数目出版单位检定用标准物质相关技术文件备注2.圆二色谱仪检定规程的摘要2范围本规程适用于新安装、使用中和修理后的，波长范围为180nm～700nm(或以此为主要谱区)的圆二色谱仪(以下简称仪器)的检定。2.1原理圆二色性定义为每摩尔物质对左圆和右圆偏振光吸收系数的差Δε：Δε＝εL－εRεL——物质对左圆偏振光的摩尔吸收系数εR——物质对右圆偏振光的摩尔吸收系数仪器测定的一般为椭圆度，摩尔椭圆度[θ]＝3300Δε，即仪器测定的信号是物质对左圆和右圆偏振光吸收系数的差。包含纵轴Δε和横轴波长的圆二色谱仅可在吸光带中观测到。CD产生于电子跃迁。有两种形式的圆二色谱：天然CD和磁诱导的MCD。CD信号仅在光活性或手性分子中出现。它被广泛地用于测定手性物质的绝对构型和研究生物高分子的构象。2.2构成仪器主要由光源部分、单色圆偏振光的产生部分、试样部分和测光部分构成。 光源部分：仪器常用的光源有氙灯、钨卤灯。单色圆偏振光的产生：由单色器将光变成单色光，单色光经偏振器产生线偏振光，然后再通过光弹调制器将其变为圆偏振光。试样部分：装置的设计必须保证在无样品时不产生假的CD信号。包括石英液槽和槽架，以进行常规的液体的CD测量。在该部分加上磁场后，即可进行MCD测量。测光和记录部分：检测部分，用光电倍增管体系(185nm～1000nm)；记录部分用微机或数字仪和记录仪。3计量单位波长(λ)：纳米(nm)摩尔椭圆度(θ)：毫度(m°)(定义毫度(m°)为圆二色测量的特定专用单位)4计量特性4.1基线平直度仪器预热1h后，基线应在±6m°以内。4.2波长准确度仪器的波长准确度应符合以下技术指标：波长范围180nm～300nm≤±0.3nm300nm～500nm≤±0.5nm500nm～700nm≤±1.0nm波长准确度4.3圆二色(CD)值的校准0.06％的樟脑磺酸铵(NH4－CSA)水溶液放入10mm石英液池，在290nm处，其CD值(椭圆度)应为192.4m°。4.4重现性在检定条件下，重复扫描相互偏差小于1m°。4.5灵敏度在检定条件下，灵敏度换档时，CD峰值相差小于2m°。5技术要求5.1外观要求5.1.1仪器应具有名称、型号、制造厂名、出厂日期和仪器编号等项标志以及使用说明书；使用过的、已检定过的仪器，应附有上一次的检定证书。5.1.2仪器各刻度盘的划线应粗细均匀，刻字应清晰，数字显示不应有缺点缺划现象。5.1.3样品室应密封并无漏光现象。5.1.4系统冷却水管路和氮气气路无泄漏。5.2安装条件5.2.1仪器应平稳地置于工作台或架上，各紧固件、接插件应紧密配合，接触良好。5.2.2氮气瓶通过减压阀向仪器通氮气。5.3检定环境5.3.1电源电压220V±10V，频率50Hz。5.3.2室温10℃～30℃。5.3.3相对湿度小于70％。5.3.4工作台不受阳光直射，无腐蚀性或其它影响测定的气体干扰。 5.4检定设备(检定用的标准物质)检定项目波长标准物质钕玻璃、钬玻璃樟脑磺酸铵NH4－CSA苯、甲醇规格具有标准参考波长(见附录)优级纯(GR)CD值校准基线GBW06104和优级纯(GR)5.5检定项目和检定方法仪器启动后，无异常的杂音。预热60min后，检定以下各项。5.5.1基线平直度的检定与校准(190nm～700nm 范围)5.5.1.1手动校准在装有甲醇的10mm液池中滴入半滴苯，放入样品室，在下列条件下扫描：灵敏度1m°/cm时间常数4s纸速2cm／min波长扩展2nm／cm狭缝1nm扫描范围260nm～250nm基线补偿器置于off档，松开固定PM的环，旋转PM，找到苯的最强吸收位置并调至最低点，上紧环。然后将灵敏度调至2m°/cm，波长扩展调至10nm/cm，在波长范围700nm～190nm间记录基线。基线平直度应在±3cm内。5.5.1.2有些仪器可用计算机进行基线的自动校准5.5.2波长准确度的检定与校准以钕玻璃、钬玻璃为标样，在下列条件下测定并记录其吸收谱图：信号模式DC记录基线设置－10狭缝1nmPM H.T.手动在测定之前，先找到最大吸收峰的波长位置，此时PM电压逐渐升高，当记录笔移到接近满刻度时固定电压，这时DC表指示大约在50μA。然后在钕、钬玻璃有吸收的范围内扫描并记录谱图。钕玻璃、钬玻璃的标准参考波长见附录B、C。若波长有偏离，则进行手动校准。有些仪器可对波长进行自动校准。5.5.3CD值的校准将0.06％的樟脑磺酸铵(NH4－CSA)水溶液倒入10mm的液池中，放入样品室，在以下条件扫描并记录CD图：灵敏度20m°/cm时间常数1s纸速2cm/min波长扩展10nm/cm狭缝1nm扫描范围350nm～270nmCD值应为192.4m°，如有偏离，需调节CD值使之等于基准值。5.5.4重现性的检定将0.005％的NH4－CSA标准溶液倒入10mm的液池中，放入样品室，在下列条件下重复扫描并记录4次，每次应在笔宽范围内重合，但在250nm以下，每次扫描相互偏差小于1m°。灵敏度2m°/cm时间常数2s纸速2cm/min波长扩展10nm/cm狭缝1nm扫描范围350nm～200nm5.5.5灵敏度显示的检定用0.06％的NH4－CSA标准溶液，分别在5mm和10mm液池中测定，条件如