附件2 小麦粉及其制品中氨基脲的测定 BJS 201902 1 范围 本方法规定了小麦粉及其制品中氨基脲残留的液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于小麦粉及以小麦粉为主要原料的各种制品中氨基脲残留量的检测。 2 原理 试样经盐酸水解，邻硝基苯甲醛过夜衍生，乙酸乙酯提取，旋蒸富集后，采用高效液相 色谱/串联质谱仪进行定性检测，采用稳定同位素内标法进行定量测定。 3 试剂和材料 注：水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1试剂 3.1.1 甲醇（CH4O）：色谱纯。 3.1.2 乙腈（C2H3N）：色谱纯。 3.1.3乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。 3.1.4乙酸铵（C2H7 NO2）：色谱纯。 3.1.5 正己烷（C6H14）：色谱纯。 3.1.6 盐酸（HCl）：分析纯。 3.1.7 邻硝基苯甲醛（C7H5NO3）：色谱纯。 3.1.8 0.2 moL/L盐酸溶液：准确量取盐酸（3.1.6）17 mL于1 L容量瓶中，用水定容至1 L。 3.1.9 0.1 moL/L邻硝基苯甲醛溶液：称取1.5 g邻硝基苯甲醛（3.1.7）于100 mL容量瓶中， 用甲醇溶解并定容至100 mL。 3.1.10乙腈饱和的正己烷：量取正己烷（3.1.5）80 mL于100 mL分液漏斗中，加入适量乙 腈（3.1.2）后，剧烈振摇，待分配平衡后，弃去乙腈即可。 3.1.11 0.010 moL/L乙酸铵：准确称取0.772 g乙酸铵（3.1.4）于1 L容量瓶中，用水定容至 1 L。 3.1.12 10%甲醇水溶液：准确量取10 mL甲醇（3.1.1）于1 L容量瓶中，用水定容至100 mL。 3.2 标准品 氨基脲及其同位素内标标准品的基本信息见表1，纯度≥99.0%。 表1 氨基脲及其同位素内标标准品的基本信息 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子量 氨基脲盐酸盐 Semicarbazide Hydrochloride 563-41-7 CH6ClN3O 111.53 氨基脲-13C,15N2 盐酸盐 Semicarbazide-13C,15N2 Hydrochloride 1173020-16-0 CH6ClN3O 114.56 3.3标准溶液配置 3.3.1 标准储备液：准确称取14.9 mg（精确到0.0001g）氨基脲盐酸盐标准品，置于50 mL 棕色容量瓶中，用甲醇（3.1.1）溶解并定容至刻度，配成浓度为200 mg/L的标准储备液， -18℃保存，存效期三个月。 3.3.2 内标标准储备液：准确称取14.7 mg（精确到0.0001g）氨基脲-13C,15N2 盐酸盐标准品， 置于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇（3.1.1）溶解并定容至刻度，配成浓度为200 mg/L的标 准储备液，-18℃保存，存效期三个月。 3.3.3 标准工作液：准确量取0.2 mL标准储备液（3.3.1），置于200 mL棕色容量瓶中，用甲 醇（3.1.1）溶解并定容至刻度，配成浓度为0.200 mg/L的标准工作液，-18℃保存，存效期 一个月。 3.3.4 内标工作液：准确量取0.2 mL内标标准储备液（3.3.2），置于200 mL棕色容量瓶中， 用甲醇（3.1.1）溶解并定容至刻度，配成浓度为0.200 mg/L的内标工作液，-18℃保存，存 效期一个月。 4 仪器与设备 4.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 4.2 天平：感量分别为0.0001 g和0.01 g。 4.3 超声波发生器。 4.4 旋转蒸发仪。 4.5 离心机。 4.5 恒温箱。 4.6 涡旋混合器。 4.7 高速离心机。 5 分析步骤 5.1试样制备 从原始样品中取出有代表性样品约500 g，充分混匀，均分成两份，分别装入干净密封袋 作为试样，密封，并注明标记。将试样置于室内避光保存。 5.1.1 衍生化 称取约2.0 g（精确至0.01 g）样品，置于50 mL玻璃比色管中，加入10 mL 0.2 moL/L 盐酸（3.1.8），涡旋30s后，在依次加入内标工作液（3.3.4）50 μL，0.1 moL/L邻硝基苯甲。。。。。。以下内容略