ICS65.020.20DB36B 15江西省地方标准DB36/T 1036-2018芝麻细菌性青枯病诊断及检测技术规程Techniquely Rules for Diagnosis and Detection of Sesame Bacterial Wilt[Ralstoniasolanacearum Smith]2018-07-03发布2019-01-04实施江西省质量技术监督局发布 DB36/T 1036-2018目次前言 ................................................................................ II12345范围 .............................................................................. 1术语和定义 ........................................................................ 1症状诊断 .......................................................................... 1病原菌形态学鉴定与致病性测定 ...................................................... 1病原菌PCR检测.................................................................... 2附录A（欧亿·体育（中国）有限公司性附录）培养基配制方法..................................................3附录B（欧亿·体育（中国）有限公司性附录）PCR检测引物反应体系条件...................................... 4IDB36/T 1036-2018前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草本标准由江西省农业厅提出并归口本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所江西生物科技职业学院本标准主要起草人：华菊玲李信申黄小梅刘清兰熊艳黄瑞荣王希史建苗盛琦饶喜IIDB36/T 1036-2018芝麻细菌性青枯病诊断及检测技术规程1范围本标准规定了芝麻细菌性青枯病（Sesame bacterial wilt）诊断及检测技术的术语和定义症状诊断病原菌形态学鉴定与致病性测定和病原菌PCR检测本标准适用于芝麻细菌性青枯病症状诊断病原菌形态学鉴定及PCR检测2术语和定义下列术语和定义适用于本文件2.116s rRNA序列细菌染色体上编码 rRNA相对应的DNA序列存在于所有细菌的染色体基因组中具有高度的保守性和特异性16s rRNA基因检测技术已成为病原细菌检测和鉴定的重要方法2.2ITS序列16S23S rRNA基因区间的一段高度可变序列该区域种间多态性丰富而种内却非常保守这些特点使得它在细菌分类鉴定研究上具有独特的优势3症状诊断初期在茎杆上出现暗绿色水浸状斑块继而呈黑褐色条斑向上下扩展顶梢常有2个3个梭形溃疡状裂缝部分病茎溃疡状裂缝可延伸至茎杆中下部溃疡状裂缝出现早而多的病株常呈畸形病株顶端先出现萎蔫继而整株呈失水状早期夜间可恢复正常后期则呈黑褐色枯死病株茎部维管束变褐色髓部空洞折断茎杆常可见菌脓形成的透明细丝茎杆表皮下常可见泡状隆起刺破后有乳白色菌脓溢出渐成为漆黑色晶亮的颗粒4病原菌形态学鉴定与致病性测定菌株分离与形态学鉴定4.14.1.1菌株分离采集典型的芝麻细菌性青枯病标本剪取病健交界处病茎3cm4cm经75%酒精消毒灭菌水冲洗后剪去两头取中间段置于装有5ml10ml无菌水的试管中静置5min左右至悬浮液变混浊用接种环蘸1