中华人民共和国出入境检验检疫欧亿·体育（中国）有限公司标准SN/T 1895—2007食品中金黄色葡萄球菌的快速计数法－ PetrifilmTM测试片法 Rapid enumeration of Staphylococcus aureus in Foods－PetrifilmTM Staph Express Count Plate method2007-05-23发布2007-12-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布 SN/T 1895—2007前言本标准包括第一法Petrifilm? 测试片直接计数法和第二法Petrifilm?测试片MPN法。1）本标准第一法修改采用了美国分析化学协会（AOAC）官方方法 特定预加工食品和加工食品（冷冻千层面、奶油冻、冷冻什锦蔬菜、冷冻洋芋饼和冷冻裹浆蘑菇）中金黄色葡萄球菌的计数Petrifilm?金黄色葡萄球菌测试片法2003.07（AOAC? OfficialMethodSM 2003.07:Petrifilm? StaphExpress CountPlateMethod fortheEnumeration ofStaphylococcusaureus inSelectedTypes ofProcessedand PreparedFoods(frozenlasagna,custard,frozenmixed vegetables,frozenhashbrowns,andfrozenbattercoatedmushrooms)）; 特定乳制品（冰淇淋、原奶、酸奶、奶酪和乳清粉）中金黄色葡萄球菌的计数Petrifilm?金黄色葡萄球菌测试片法2003.08（AOAC? OfficialMethodSM 2003.08:Petrifilm? StaphExpress CountPlate Methodfor the Enumeration ofStaphylococcus aureus inSelected Dairy Foods.(strawberry ice cream,raw milk, vanillayogurt, whey powder, and mozzarellacheese)）;特定肉、家禽和海产品（熟制和切割的鸡肉、汉堡、三文鱼和香肠）中金黄色葡萄球菌的计数Petrifilm?金黄色葡萄球菌测试片法2003.11AOAC? OfficialMethodSM 2003.11: Petrifilm? StaphExpress Count Plate Method fortheenumeration of Staphylococcus aureus in Selected Meat, Seafood and Poultry。本标准的附录A是规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国合格评定国家认可委员会、内蒙古出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局、大连市产品质量检验所、黑龙江出入境检验检疫局、大连启元科技发展有限公司、3M中国有限公司。本标准起草人：卢行安、刘中学、曹际娟、李宏、孙杰、朱海、谢昭聪、陈兆君、刘颜泓、李苏龙、周振亚、陆苏飙。本标准系首次发布的检验检疫欧亿·体育（中国）有限公司标准。1）为美国3M公司产品的商品标志。I SN/T 1895—2007食品中金黄色葡萄球菌快速计数法－Petrifilm?测试片法1范围本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌快速计数法－PetrifilmTM测试片法。本标准适用于食品和食物中毒样品中金黄色葡萄球菌的计数。既适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品也适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。SN 0172 出口食品中金黄色葡萄球菌测定方法3原理3.1PetrifilmTM金黄色葡萄球菌测试片(Staph Express Count Plate, STX)是一种预先制备好的快速检验系统。它含有具有显色功能并经改良的Baird-Parker培养基，对金黄色葡萄球菌具有很强的选择性，并含有冷水可溶性凝胶。测试片上的紫红色菌落为金黄色葡萄球菌。当测试片上出现除紫红色以外的其它任何颜色(如黑色或蓝绿色)，则必须使用确认反应片。此确认反应片含有显色剂和脱氧核糖核酸(DNA)。金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶(DNase)会和反应片中的显色剂形成粉红色晕圈。4设备和材料4.1恒温培养箱：36℃±1℃。4.2均质器（旋刀式或拍击式）或等效的设备。4.3pH计或精密pH试纸。4.4放大镜或/和菌落计数器。5培养基和试剂5.1无菌生理盐水：称取 8.5ｇ氯化钠溶于 1000 mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。5.25.31 mol/L NaOH：称取 40g NaOH溶于1000 mL蒸馏水中。1 mol/L HCl：移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL。5.4PetrifilmTM金黄色葡萄球菌测试片。5.5PetrifilmTM金黄色葡萄球菌确认反应片。第一法 Petrifilm 测试片直接计数法TM6检验程序检验程序见图1。1