GB/T 14929.8—1994中华人民共和国国家标准大米中杀虫双残留量测定方法Method for determination of Nereistoxin derivativeSha chongshuang residues in riceGB/T 14929.8—19941主题内容与适用范围本标准规定了用气相色谱法测定大米中杀虫双和沙蚕毒素的含量。本标准适用于大米中杀虫双、沙蚕毒素的残留量测定。本标准最底检出限为0.1ng2原理大米样品经0.1mol/L盐酸提取后，在碱性溶液中，转化成沙蚕毒素，以三氯甲烷提取后，蒸除三氯甲烷，用甲醇定容至 1 mL，以FPD-GC测定。3试剂3．10.1 mol/L盐酸。3．20.1 mol/L氢氧化钠。3．30.1 mol/L硫化钠水溶液。3．4甲醇：分析纯，重蒸。3．5三氯甲烷：分析纯，重蒸加无水乙醇，使含 1%乙醇。3．6无水乙醇：分析纯。3．7无水硫酸钠。3．8杀虫双标准溶液：精确称取杀虫双23.8mg，以甲醇溶解，稀释至100mL，每毫升中杀虫双含量相当于沙蚕毒素 100 ug。根据需要，吸取一定量上述标准溶液，以甲醇稀释至一定体积，配制成应用液。杀虫双转化：相当于沙蚕毒素4 ug的杀虫双，接下述条件转化，最终浓度为每毫升含2 ug沙蚕毒素。3．9沙蚕毒素标准溶液：精确称取沙蚕毒素草酸盐 16.00 mg，以甲醇溶解，稀释至100 mL，每毫升含沙蚕毒素100ug，根据需要，吸取一定量上述标准溶液，以甲醇稀释至一定体积，配制成应用液。4仪器4．1台式离心要。4．2旋转蒸发器。4．3玻璃蒸发器。4．4氮气蒸馏器。4．5气相色谱仪（具火焰光度检测器，FPD）。4．6微量注射器。4．7一般玻璃仪器（略）。5分析步骤5．1样品处理：称取大米样品 5 g，加 10 mL0.1 mol/L 盐酸溶液，在振荡器上振荡 30 min，于 1600 r/min 离心 10 min，将上清液倒于带盖量筒中，再以10mL0.1mol/L盐酸洗涤样品，如此重复三次。合并盐酸提取液，调节pH8.5～中华人民共和国卫生部1994—01—24批准1994—08—01实施 GB/T 14929.8—19949，加0.1mol/L硫化钠溶液2mL放置过夜，加2倍样品液体积的三氯甲烷于分液漏斗中，剧烈振摇1 min，静置分层。将三氯甲烷层经无水硫酸钠滤于三角瓶中，在旋转蒸发器中45℃蒸除氯仿，至剩余少许时，立即取出，用甲醇定容至1mL，待测定。5．2气相色谱法条件：5．2．1色谱柱：3 mm（内径）×2 m玻璃柱；填装涂有1.5%OV-17ChromosorbW(80～100目)的担体。5．2．2温度柱温：160℃；汽化室温：200℃；FPD检测器温：170℃。5．2．3气体速度载气（氮气）流速：70 mL/min；氢气流速：150 mL/min；空气流速：50 mL/min。5．2．4其他条件仪器灵敏度：×10 ；2衰减：×32；纸速：0.5 cm/min。5．3测定：按上述色谱条件调试仪器，待仪器稳定后，用微量注射器注入样品或标准液，以保留时间为定性指标。取杀虫双转化后相当于0.5、1、2、3、4、5ng的沙蚕毒素，注入色谱仪中，测量峰高。以杀虫双含量为横坐标，峰高为纵坐标，在双对数坐标纸上绘制工作曲线，根据样品的几高定量。6计算X =B ?V ×2.38A?m式中：X——样品中杀虫双含量，mg/kg；B——测得样品的峰高（或面积）值，查标准曲线后得到的沙蚕毒素量，ng；V——定容体积，mL；A——进样量，uL；m——样品质量，g。杀虫双分子量为355，沙蚕毒素分子是为149，将测得的沙蚕毒素量乘以2.38，即为杀虫双含量。7精密度大米样品添加回收实验结果的变异系数小于 20%。8其他大米中沙蚕毒素及标准沙蚕毒素色谱图如下：中华人民共和国卫生部1994—01—24批准1994—08—01实施 GB/T 14929.8—1994附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草。本标准主要起草人王绪卿、林媛真、陈惠京。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。中华人民共和国卫生部1994—01—24批准1994—08—01实施