ICS07.100.30DB34C 53安徽省地方标准DB 34/T 1539—2011 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法 Testing for Salmonella in Poultry eggs Qualtative polymerase chain reaction(PCR) method 2011-11-15发布2011-12-15实施安徽省质量技术监督局发 布 DB34/T 1539—2011前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心提出。本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。本标准主要起草人：陈戈、张波、汪永信、安虹、刘娟娟、程潇。I DB34/T 1539—2011禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法1范围本标准规定了禽蛋中沙门氏菌的荧光 PCR 检测方法。本标准适用于禽蛋及禽蛋制品中沙门氏菌的快速检测。本标准适用于该产品的风险预警监测及相关科学研究。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4789.4食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验GB/T 4789.19食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB 19489实验室生物安全通用要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1CT值PCR 扩增过程中荧光信号强度达到阈值所需要的循环数。4方法原理本方法是基于 TaqMan 实时荧光PCR技术，选取沙门氏菌种属特异性的 invA 基因序列设计引物和两端有荧光基团标记的寡核苷酸探针。PCR 每进行一次循环，PCR 产物的量与荧光信号的强度呈对应关系，当荧光信号超过所设定的阈值时，荧光信号可被检测出来。通过观察实时 PCR 扩增曲线，对样品中的沙门氏菌进行快速检测。5设备和材料5.1实时荧光PCR仪。5.2离心机。5.3微量移液器和灭菌吸头（10μL、100 μL、200μL、1000μL）。5.4恒温培养箱。5.5恒温水浴锅。1