文本描述
摘要
目的:黄曲霉毒素(AflatOXin,AFT)和杂色曲霉素(Sterigmatoeystin,ST)是众所
周知的毒性极强的真菌毒素:,〕在食品安全方面,其为进出口贸易之必检项目,而且也建
立了国际性之最高残留限量要求标准(MRL值),如果可以建立一个预警检测方案将能够在
毒素未产生前即获得危险性报告,而有机会及时采取措施避免进一步的经济损失而要建
立预警(prediCt)检测的手段需要选定一个毒素的生物指示分子(bimarker)
方法:1)建立(versiC1rinA,vA)的HPLC检测方法,包括vA标准品的分离!纯
化制备和鉴定2)对VA的毒性进行评价,把纯化之VA标准品进行毒理学实验以Ames
试验和人体外周淋巴细胞微核实验进行3)对纯培养的黄曲霉和寄生曲霉以及感染了寄
生曲霉的大米样品检测其VA和ST及AFTBI的产出情况本项目的关键问题和工作难点在
于VA标准品的纯化制备,以及获得足够的VA以用于毒性的分析和评价计划利用可积累
VA的寄生曲霉诱变菌株并使用了分析型高效液相色谱仪!制备型高效液相色谱仪和高效
液相质谱仪的现代检测技术
结果:1)本文成功地纯化出纯度达980&以上的VA标准品ZOmg2)毒理学实验显示
Ames试验呈阳性结果:VA2.5林g/皿S0+,5协g/皿59一(TA98)而在人体外周淋巴细胞微核实
验在480Onmol/L时呈阳性结果,表明VA为一遗传毒物3)纯培养的黄曲霉和寄生曲霉
在各培养基上,VA均能够在第7天和第10天稳定地检测到,AFTB:仅在PG培养基上,第
10天才被检测到在染毒大米(寄生曲霉)样品中,27oC下,第5!7!10天均可检测到VA
而AFTB;要到第14天才能够被检测到(TLC法)在28OC下,第3!5!7!10天均可检测到
VA,而AFTB,在第7天才开始检测到(HPLC法)
结论:建立了用HPLC方法检测VA的手段VA作为黄曲霉毒素的预警报告分子是可行
的VA显示致畸变毒性Ames试验显示在鼠肝微粒体存在或不存在下均呈阳性(59-2.5协g/
皿,59一5林g/皿);人体外周淋巴细胞微核实验显示vA遗传毒性呈阳性(1.6林g/m1)因此,
粮食样品中检出VA意味着该样品存在着高危险性的AFTB!污染,而且该样品己被毒素污染
虽然此时可能未检出AFTB;
关键词:杂色曲菌素;预警信号;纯化;致突变性;鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体试
验;人体外周淋巴细胞微核实验
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